一、比色皿测菌液的方法?

检测方法有:


1.计数器测定法:

即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果。

本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

2、电子计数器计数法:

电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。

该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。

3、活细胞计数法

常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液,作一系列的倍比稀释,然后将定量的稀释液进行平板培养,根据培养出的菌落数,可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意:①一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。

广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是最常用的活菌计数法。

4、比浊法

比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。

此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。

二、单细胞生物分批发酵生长曲线一般分为哪几个阶段?

微生物生长曲线是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标,培养62616964757a686964616fe58685e5aeb931333433626438时间为横坐标画得的曲线。

在发酵中,通常是用比浊法得到的曲线来监测微生物生长情况的。

比浊法的原理是:微生物的生长引起培养物混浊度的增高。

od值是什么(微生物od值是什么)

通过分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。

该法主要用于发酵工业菌体生长监测。

以此得出的吸光光度值称为“OD值”。

典型的微生物生长曲线包括四个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。

迟缓期(迟滞期、调整期)特点:生长速率常数为零。

微生物刚刚接种到培养基之上,其代谢系统需要适应新的环境,同时要合成酶、辅酶、其他代谢中间代谢产物等,所以此时期的细胞数目没有增加。

对数期(对数生长期)特点:生长速率最快、代谢旺盛、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致。

这是因为经过调整期的准备,为此时期的微生物生长提供了足够的物质基础,同时外界环境也是最佳状态。

但此阶段基本没有发酵产物积累。

稳定期特点:活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、发酵产物大量积累,是生产的收获期。

营养物质的消耗使营养物比例失调、有害代谢产物积累、PH值EH值等理化条件越来越不适宜。

衰亡期特点:细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现自溶现象。

这是因为随着发酵产物和其他代谢产物的大量积累,生长环境对继续生长越来越不利、细胞的分解代谢大于合成代谢、继而导致大量细菌死亡。

微生物生长曲线

三、微生物培养基的质量控制包括哪些方面?

微生物培养基的酸碱度、凝胶强度和选择性等直接影响到培养基的质量,在理化试验方法中采用连接可渗透陶器型液体接头的电极和平头电极或者连接微型探头的电极可分别测定液体和固体培养基的pH值 ,而采用 Gelometer和the LFRA Texture Analyser可测定固体培养基的凝胶强度。

在微生物学方法中固体培养基采用倾注平板法、涂布法、划线法(半定量法)、改良的 Miles-Misra法等测定生长情况,液体培养基采用稀释法测定生长率,用目标菌和杂菌的混合菌株评价选择性增菌培养基的选择性,利用OD值评价液体培养基生长率等。ICFMH (国际食品微生物学和卫生学委员会培养基工作组)、ISO、FDA以及我国卫生部等相继制定了培养基质量控制的标准,但目前还没有一个系统的适合我国国情的培养基质量控制国家标准,以致各相关单位采用的标准不一致,所以制定培养基质量控制国家标准非常关键。

四、发酵性能测定中od值是什么意思?

OD值是发酵培养基浓度、色度、菌体量和菌体伸长膨大的一个综合性指标。净增OD则主要是菌体生长量和菌体伸长膨大所致。在谷氨酸发酵过程中,净增OD的控制是一个重要的控制参数